Proteómica

Descripción

El Servicio de Proteómica del IBMCP tiene por objeto ofrecer apoyo tecnológico a los grupos de investigación del IBMCP o de otros centros públicos o privados, que precisen del uso de herramientas de la Proteómica.

El Laboratorio de Proteómica cuenta con el equipamiento necesario para ofrecer las siguientes prestaciones:

RESOLUCIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL

Se puede llevar a cabo la separación de mezclas proteicas mediante electroforesis bidimensional (2D). Es una técnica mucho más resolutiva que la convencional (la electroforesis monodimensional), ya que en ésta, las proteínas únicamente se separan en función de su masa, mientras que el 2D, se separan tanto por su carga nativa, como por su masa.

PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

Por otro lado, el servicio cuenta con un FPLC para la separación de proteínas mediante cromatografía líquida.

Se pueden purificar proteínas mediante cromatografía de intercambio iónico (HiTrap Q y SP de GE), de filtración (superdex 30, 75 y 200, superose 6 increase de GE) o afinidad (HisTrap, HiTrap ProteinA, GSTrap, etc), utilizando las columnas correspondientes.

NOTA: con este equipo pueden realizarse purificaciones de proteínas que forman parte de cuerpos de inclusión mediante la técnica de ‘refolding on column’, pudiéndose recuperar la proteína de interés purificada, soluble y activa.

PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

El IBMCP ha puesto a punto un nuevo servicio de producción de proteína recombinantes en E. coli. Los sistemas bacterianos para la expresión de proteínas heterólogas presentan importantes ventajas en cuanto a facilidad de utilización, coste y tiempos de producción.

El servicio parte del organismo transformado con la proteína recombinante etiquetada con His/MBP/GST. Realizará ensayos de expresión a pequeña escala para diseñar el protocolo con los parámetros optimizados para la proteína específica. Más información en el siguiente PDF:

ANÁLISIS BIOINTERACTÓMICO

La calorimetría isotérmica de titulación es una técnica para medir afinidad de interacción. Se aplica en estudios básicos de interacciones biológicas, tipo proteína-proteína, enzima-sustrato, proteína-RNA/DNA, etc. o en estudios farmacológicos de validación y/u optimización de compuestos candidato.

Normas, solicitudes, tarifas

NORMAS

RESOLUCIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL

Características de las muestras:

Tiras de isoelectroenfoque de 7 cm: se necesitan, como mínimo, 100 μg de proteína. Tiras de isoelectroenfoque de 24 cm: se necesitan, como mínimo, 250 μg de proteína.

Lo ideal es que, en ambos casos, las proteínas estén resuspendidas en un tampón determinado, en un volumen máximo de 200 μl.

NOTA: Es muy importante que desde el proceso inicial de extracción de proteínas, el usuario tome precauciones frente a la contaminación con queratinas de sus muestras, utilizando guantes y bata en todo momento.

PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

Características de las muestras:

La muestra ha de ser filtrada y/o centrifugada previamente a la inyección para evitar la obturación de filtros de las columnas y del FPLC.

Los tampones han de ser proporcionados por el usuario, pudiendo ser filtrados en el servicio.

PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

Características de las muestras:

El Servicio parte de la bacteria transformada, proporcionada por el usuario.

ANÁLISIS BIOINTERACTÓMICO

Características de las muestras:

El usuario ha de tener los compuestos/moléculas objeto de estudio con la mejor calidad de pureza posible, con el fin de optimizar los resultados obtenidos. Estos han de estar en el mismo tampón, que también es necesario para el llenado de la celda de referencia.

TARIFAS

SERVICIOS OFERTADOS POR EL LABORATORIO DE PROTEÓMICA DEL IBMCP

                                                                                                                                                                     (Tarifas en €)

                                                                                                                  Usuarios Internos                  Centros Públicos                    Empresas

Separación de proteínas                                                                                                                                                          

2D Electroforesis                                                                                                                                                   

Gel 24×20 cm                                                                                                             75                                          125                                         225

Gel 7×8 cm                                                                                                                  50                                          90                                          185

2D Electroforesis para Western (Sin tinción)                                                                                                                                                           

Gel 24×20 cm                                                                                                             60                                         100                                        180

Gel 7×8 cm                                                                                                                  40                                          75                                          140

Purificación de Proteínas                                                                                                                                                        

Cromatografía de Afinidad                                                                                       16                                          25                                          50

Cromatografía de Intercambio Iónico                                                                      16                                          25                                          50

Cromatografía de Filtración                                                                                      22                                         35                                           70

Producción de Proteínas Recombinantes                                                                                                                                                                   

Consultar con el Servicio

Análisis Biointeractómico                                                                                                                                                       

Consultar con el Servicio

Equipamiento

Ettan IPGphor3

Ettan DALTsix

ÄKTA purifier

Microcal ITC

Visibilización del nuevo equipo Microcal ITC, financiado por Fondos FEDER de la Comunidad Valenciana

Parte del equipamiento científico de este servicio ha sido cofinanciado con Fondos FEDER

Personal


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sutarher@ibmcp.upv.es

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