El Servicio de Proteómica del IBMCP tiene por objeto ofrecer apoyo tecnológico a los grupos de investigación del IBMCP o de otros centros públicos o privados, que precisen del uso de herramientas de la Proteómica.
El Laboratorio de Proteómica cuenta con el equipamiento necesario para ofrecer las siguientes prestaciones:
RESOLUCIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL
Se puede llevar a cabo la separación de mezclas proteicas mediante electroforesis bidimensional (2D). Es una técnica mucho más resolutiva que la convencional (la electroforesis monodimensional), ya que en ésta, las proteínas únicamente se separan en función de su masa, mientras que el 2D, se separan tanto por su carga nativa, como por su masa.
Por otro lado, el servicio cuenta con un FPLC para la separación de proteínas mediante cromatografía líquida.
Se pueden purificar proteínas mediante cromatografía de intercambio iónico (HiTrap Q y SP de GE), de filtración (superdex 30, 75 y 200, superose 6 increase de GE) o afinidad (HisTrap, HiTrap ProteinA, GSTrap, etc), utilizando las columnas correspondientes.
PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES
El IBMCP ha puesto a punto un nuevo servicio de producción de proteína recombinantes en E. coli. Los sistemas bacterianos para la expresión de proteínas heterólogas presentan importantes ventajas en cuanto a facilidad de utilización, coste y tiempos de producción.
El servicio parte del organismo transformado con la proteína recombinante etiquetada con His/MBP/GST. Realizará ensayos de expresión a pequeña escala para diseñar el protocolo con los parámetros optimizados para la proteína específica. Más información en el siguiente PDF:
ANÁLISIS BIOINTERACTÓMICO
La calorimetría isotérmica de titulación es una técnica para medir afinidad de interacción. Se aplica en estudios básicos de interacciones biológicas, tipo proteína-proteína, enzima-sustrato, proteína-RNA/DNA, etc. o en estudios farmacológicos de validación y/u optimización de compuestos candidato.
RESOLUCIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL
Tiras de isoelectroenfoque de 7 cm: se necesitan, como mínimo, 100 μg de proteína. Tiras de isoelectroenfoque de 24 cm: se necesitan, como mínimo, 250 μg de proteína.
Lo ideal es que, en ambos casos, las proteínas estén resuspendidas en un tampón determinado, en un volumen máximo de 200 μl.
NOTA: Es muy importante que desde el proceso inicial de extracción de proteínas, el usuario tome precauciones frente a la contaminación con queratinas de sus muestras, utilizando guantes y bata en todo momento.
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS MEDIANTE CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA
La muestra ha de ser filtrada y/o centrifugada previamente a la inyección para evitar la obturación de filtros de las columnas y del FPLC.
Los tampones han de ser proporcionados por el usuario, pudiendo ser filtrados en el servicio.
PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES
El Servicio parte de la bacteria transformada, proporcionada por el usuario.
ANÁLISIS BIOINTERACTÓMICO
El usuario ha de tener los compuestos/moléculas objeto de estudio con la mejor calidad de pureza posible, con el fin de optimizar los resultados obtenidos. Estos han de estar en el mismo tampón, que también es necesario para el llenado de la celda de referencia.
SERVICIOS OFERTADOS POR EL LABORATORIO DE PROTEÓMICA DEL IBMCP
(Tarifas en €)
Usuarios Internos Centros Públicos Empresas
Separación de proteínas
2D Electroforesis
Gel 24×20 cm 100 220 320
Gel 7×8 cm 70 130 240
2D Electroforesis para Western (Sin tinción)
Gel 24×20 cm 80 150 250
Gel 7×8 cm 55 110 180
Purificación de Proteínas
Cromatografía de Afinidad 16 25 50
Cromatografía de Intercambio Iónico 16 25 50
Cromatografía de Filtración 22 35 70
Producción de Proteínas Recombinantes
Consultar con el Servicio
Análisis Biointeractómico
Consultar con el Servicio
Ettan IPGphor3
Ettan DALTsix
ÄKTA purifier
Microcal ITC
Visibilización del nuevo equipo Microcal ITC, financiado por Fondos FEDER de la Comunidad Valenciana
| Parte del equipamiento científico de este servicio ha sido cofinanciado con Fondos FEDER |
